保持细胞高活力:首选海狸磁珠细胞分选 2018/12/14

导读:分选细胞数量多、没有流式仪器、需要保持细胞高活力的小伙伴们,磁珠分选是首选的方法!

细胞分选是很多研究僧会遇到的实验,选对了方法,实验也就事半功倍,选择哪种细胞分选方法是适合自己实验的方法呢,今天小狸和大家具体聊聊……
细胞分选是根据细胞属性,把一种细胞从多细胞样?#20998;?#20998;离出来的方法。细胞分选常见的方法有免疫磁珠分选、流式细胞分选、密度梯度离心、免疫密度离心,其中前两种是最常用的细胞分选方法。那么小狸先简单叨叨这两种方法原理与特点。

细胞分选原理
流式分选一般是电荷式分选,即对感兴趣的目标细胞(荧光染色或标记)所在的液滴充?#31995;?#33655;,液滴经过电极板,通过电场作用发生偏转,从而实现分选。
磁珠分选使用磁珠?#21058;?#30340;抗体去标记细胞,然后把标记好的细胞悬液置于磁场中,带磁珠的细胞就留在试管里,不带磁珠的细胞在上清中,从而实现分选。

流式分选与磁珠分选的比较

综上,对于分选细胞数量多,或者没有流式仪器,再或者需要保持细胞高活力的小伙伴们,磁珠分选是大家首选的方法。

无需流式仪,保持细胞高活力细胞分选方法——首选海狸磁珠法细胞分选

做磁珠分选,大家首先要根据自己的实验目的与指标来选择是用阳选、阴选还是复合分选。

阳选、阴选、复合分选
阳性分选:运用特异性抗体?#21058;?#30913;珠直接从细胞混合物中分离目的细胞的分选方法称为positive selection。阳性分选中磁珠标记的细胞即为目的细胞。该法简单、快速、细胞得率和纯度?#32454;摺?#22914;采用anti-CD14磁珠分选CD14+巨噬细胞。


阴性分选(也叫去除分选):用抗体?#21058;?#30913;珠去除无关细胞,使目的细胞得以纯化和分离的分选方法称为negative selection。阴性分选中磁珠标记的细胞为非目的细胞。阴性分选法?#35270;?#20110;:
①从细胞混合物中去除?#25345;?#31867;型细胞。如肿瘤细胞;
②缺乏针对目的细胞筛选的特异性抗体,如肿瘤细胞 ;
③抗体和目的细胞结合可能诱导细胞活化,影响后续细胞功能分析。


复合分选:将阴性分选和阳性分选相结合的分选方法。?#35270;?#20110;:
①分选非常稀有细胞,可采用阴性分选发?#28909;?#38500;其他杂细胞,再采用阳性分选筛选目的细胞;
②非目的细胞也表达用来阳性选择的抗原。
③?#26723;?#32454;胞分选的成本,与流失分选联合使用。(很多专家正在使用的方法)

对于磁珠分选方法,小伙伴们普遍用的应该是美天旎或Thermo的磁珠分选产品。今天小狸给大家带来大福利,一款性价比更高的细胞分选磁珠——BeaverBeads™ Streptavidin,只用普通的磁性分离架,?#32431;?#36827;行细胞分选,细胞去除率可到80%-90%。

大粒径磁珠分选的实验流程图



利用SA磁珠固定生物素标记的抗体(?#31579;?#25454;需要去除细胞种类,选择固定1种或多种抗体),室温孵育15 min,洗涤、重悬后,?#32431;?#36827;行后续的细胞分选。
磁珠和细胞投入比例推荐:
50 μL磁珠(10 mg/mL)——2 μg生物素化抗体——捕获10^6-10^7个细胞
产品图片:

订购信息

使用海狸SA磁珠已发表文章:
1、NATURE IMMUNOLOGY  卷: 16   期: 9   页: 991-999   出版年: SEP 2015
The transcription factor TCF-1 initiates the differentiation of TFH cells during acute viral infection
2、Immunity  47, 538–551  2017.08
The Kinase mTORC1 Promotes the Generation and Suppressive Function of Follicular Regulatory T Cells
3、Frontiers in Immunology   Volume 9 , Article 1127 ,May 2018
The Kinase complex mTOR complex2 Promotes the Follicular Migration and Functional Maturation of Differentiated Follicular Helper CD4+ T cells During Viral infection

关于海狸

海狸公司创立于2011年底,落户在风景秀丽的苏州工业园区独墅湖畔生物医药产业园(BioBAY)。公司以纳米磁珠技术和生物材料表面技术为核心,通过试?#37327;?#21457;和设备技术整合,面向生物科?#23567;?#20307;外诊断和基因检测领域,提供科研和工?#23548;?#21035;的纳米磁珠原?#31232;?#34507;白?#21058;?#20013;间体、免疫磁珠、核酸提取试剂?#23567;?#36741;助生物耗材及配套自动化设备等系列产品。

联系我们
  • 电话:400-600-3979
  • 地址?#26680;?#24030;工业园区华云路1号桑田岛科创园B区4号楼
安徽25选5开奖结果